کلون سازی و بیان سیتوپلاسمی l-آسپاراژیناز ii در باکتری اشریشیا کلی

Authors

حسین مهبودی

منصور عباچی

شهرام عراقی

هاله حامدی فر

بهروز وزیری

abstract

سابقه و هدف: ال-آسپاراژیناز (تیپ ii) با فعالیت ضدتوموری به طور طبیعی توسط باکتری اشریشیا کلی تولید می گردد. این آنزیم با تبدیل ال- آسپاراژین موجود در خون به آمونیوم و آسپارتیک اسید، در درمان لوکمیای لمفوبلاستیک حاد (all) مورد استفاده قرار می گیرد. هدف از این پژوهش، تولید سیتوپلاسمی آنزیم ال- آسپاراژیناز ii و کلون سازی ژن آن بدون سیگنال پپتید و حذف متیونین ابتدایی بود. مواد و روش ها: در ابتدا ژن ال- آسپاراژیناز ii با روش pcr از اشریشیا کلی سویه k12 جداسازی و درون وکتور بیانی pet32 مهندسی شده کلون گردید. توالی یابی و ارزیابی بیان ژن مورد نظر مطابق با روش های متداول به انجام رسیدند. سپس پلاسمید نوترکیب حاوی ژن متیونین آمینوپپتیداز خالص سازی گردید و با روش شوک حرارتی به درون باکتری تولید کننده آسپاراژیناز نوترکیب انتقال داده شد. یافته ها: بیان ال- آسپاراژیناز سیتوپلاسمی بیش از نوع پری پلاسمی بود. همچنین با توجه به بیان بالای آنزیم متیونین آمینوپپتیداز در میزبان بیانی اشریشیا کلی origami، انتظار می رود که این آنزیم به طور مؤثری توانسته موجب حذف متیونین ابتدایی ال- آسپاراژیناز شود. نتیجه­گیری: نتایج به دست آمده در این مطالعه در راستای معرفی میزبان با قابلیت بیان بالای ال- آسپاراژیناز نوترکیب در سیتوپلاسم، می تواند گامی بزرگ در مسیر درمان لوکمی لنفوبلاستیک حاد و نیز افزایش تولید این آنزیم در صنعت محسوب گردد.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

کلون‌سازی و بیان سیتوپلاسمی L-آسپاراژیناز II در باکتری اشریشیا کلی

سابقه و هدف: ال-آسپاراژیناز (تیپ II) با فعالیت ضدتوموری به طور طبیعی توسط باکتری اشریشیا کلی تولید می‌گردد. این آنزیم با تبدیل ال- آسپاراژین موجود در خون به آمونیوم و آسپارتیک اسید، در درمان لوکمیای لمفوبلاستیک حاد (ALL) مورد استفاده قرار می‌گیرد. هدف از این پژوهش، تولید سیتوپلاسمی آنزیم ال- آسپاراژیناز II و کلون‌سازی ژن آن بدون سیگنال پپتید و حذف متیونین ابتدایی بود. موا...

full text

کلون‌سازی و بیان سیتوپلاسمی L-آسپاراژیناز II در باکتری اشریشیا کلی

سابقه و هدف: ال-آسپاراژیناز (تیپ II) با فعالیت ضدتوموری به طور طبیعی توسط باکتری اشریشیا کلی تولید می‌گردد. این آنزیم با تبدیل ال- آسپاراژین موجود در خون به آمونیوم و آسپارتیک اسید، در درمان لوکمیای لمفوبلاستیک حاد (ALL) مورد استفاده قرار می‌گیرد. هدف از این پژوهش، تولید سیتوپلاسمی آنزیم ال- آسپاراژیناز II و کلون‌سازی ژن آن بدون سیگنال پپتید و حذف متیونین ابتدایی بود. موا...

full text

کلون سازی، تعیین توالی و بیان ژن آسپاراژیناز باکتری اروینیا کریزانتمی

سابقه و هدف: آنزیم L - آسپاراژیناز داروی موثر در درمان لوکمی لنفوبلاستیک و لنفومای غیرهوچکینی است. مهم‌ترین باکتری‌های مولد این آنزیم باکتری‌های اشریشیا کلی و گونه‌های مختلف اروینیا به‌ویژه اروینیا کریزانتمی می‌باشند.هدف از این پژوهش، ارزیابی آنزیم L-آسپاراژیناز باکتری اروینیا کریزانتمی DSM 4610 بود. مواد و روش‌ها: در ابتدا DNA ژنومی باکتری...

full text

کلون سازی، تعیین توالی و بیان ژن آسپاراژیناز باکتری اروینیا کریزانتمی

سابقه و هدف: آنزیم L - آسپاراژیناز داروی موثر در درمان لوکمی لنفوبلاستیک و لنفومای غیرهوچکینی است. مهم‌ترین باکتری‌های مولد این آنزیم باکتری‌های اشریشیا کلی و گونه‌های مختلف اروینیا به‌ویژه اروینیا کریزانتمی می‌باشند.هدف از این پژوهش، ارزیابی آنزیم L-آسپاراژیناز باکتری اروینیا کریزانتمی DSM 4610 بود. مواد و روش‌ها: در ابتدا DNA ژنومی باکتری...

full text

بیان استرپتودورناز نوترکیب در باکتری اشریشیا کلی

زمینه و هدف: در عفونت های چرکی پوستی، غلظت چرک در ارتباط با دزاکسی ریبو نوکلئوپروتئین هاست.استفاده از استرپتودورناز که یک دزاکسی ریبونوکلئاز است به همراه استرپتوکیناز به حل شدن ترشحات کمک می‎کند، در نتیجه ترمیم زخم در اثر خارج شدن چرک از بافت نکروز شده صورت می‎گیرد. هدف از این مطالعه تولید استرپتودورناز نوترکیب از سوش استرپتوکوک گروه a که از نظر تولید استرپتودورناز پر بازده است، توسط وکتور بیان...

full text

کلون سازی، تعیین توالی و بیان ژن آسپاراژیناز باکتری اروینیا کریزانتمی

سابقه و هدف: آنزیم l - آسپاراژیناز داروی موثر در درمان لوکمی لنفوبلاستیک و لنفومای غیرهوچکینی است. مهم ترین باکتری های مولد این آنزیم باکتری های اشریشیا کلی و گونه های مختلف اروینیا به ویژه اروینیا کریزانتمی می باشند.هدف از این پژوهش، ارزیابی آنزیم l-آسپاراژیناز باکتری اروینیا کریزانتمی dsm 4610 بود. مواد و روش ها: در ابتدا dna ژنومی باکتری استخراج و پس از طراحی پرایمرهای اختصاصی echr asn f و e...

full text

My Resources

Save resource for easier access later


Journal title:
فصلنامه علمی پژوهشی دنیای میکروب ها

Publisher: دانشگاه آزاد اسلامی واحد جهرم

ISSN 2008-3068

volume 3

issue شماره 2 (پیاپی 7) 2010

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023